脱氢异雄酮激素检测试剂盒

【产品名称】

通用名称：脱氢异雄酮检测试剂盒（酶联免疫法）

英文名称：DHEA ELISA

【产品规格】

96T

【预期用途】

此脱氢异雄酮激素检测试剂盒是一款酶免试剂盒，可用于人血清中脱氢异雄酮的体外定量检测。

【前言简介】

脱氢异雄酮是19C的类固醇激素，由肾上腺皮质产生，极少量的由性腺产生。DHEA是睾酮和雌激素合成的前体，由于17-oxo的存在，脱氢异雄酮与雄性激素活性有关联，只有10%的睾酮是由其产生的，然而在新生儿和成年妇女体内，脱氢异雄酮含量比睾酮高出数倍，周边组织也迅速合成雄性激素（雄烯二酮和睾酮），还有可能会产生雌性激素。而且脱氢异雄酮与性激素和球蛋白的连接有关系，这些因素都可能增加DHEA的生物效能。

脱氢异雄酮的生理方面的作用还没有确切的定义，在体内的影响包括，对细胞增殖的影响和细胞新陈代谢的影响。同时也有研究提到DHEA可能对胆固醇，脂代谢，胰岛素敏感度，分泌和免疫功能有影响。在精神分裂症和肥胖症患者体内的DHEA水平时不正常的。DHEA治疗已提出一些情况，包括肥胖症和心血管疾病。

【检测原理】

此酶免试剂利用的是竞争法原理。微孔板上包被有多克隆抗体。样品中的内源性抗原和酶标抗原竞争结合包被在微孔中的抗原的结合位点。温育之后，清洗微孔以终止反应。加入底物液后，颜色强度与样品中的抗原的量成反比。

【试剂盒组成成分】

微孔板          1×12×8     

包被有抗DHEA抗体（多克隆）

标准品          6×1ml       

即用； 0、0.37、1.1、3.3、10、30 ng/ml

质控品          2×1ml

即用型、具体浓度见质控单               

酶联物          1×13mL    

含辣根过氧化物酶标记的DHEA，防腐剂

底物液          1×15mL     

即用型、内含TMB

终止液          1×15mL  

含1M硫酸，避免接触终止液，会刺激和灼伤皮肤

洗涤液          1×100mL  

10倍浓缩

所需材料（未提供）

1) 移液器    体积：50；100；200μL

2) 计时器

3) 酶标仪

4) 双蒸水或去离子水

5) 线性-对数坐标纸或数据处理软件

【储存条件】

试剂盒必须储存于2-8°C的环境中，可至有效期，不要使用过期的试剂。开封微孔板用包装袋密封保存在2-8°C环境下时，可保存8周

【样品要求】

实验需使用血清样本

不要使用脂血、溶血、黄疸血的样本

样本采集

采用静脉穿刺采集血液样本，允许血液凝集，通过离心分离血清。

样本储存

2~8℃下可保存24小时。要保存更长时间需保存在-20℃环境下（12个月）

样品稀释

样本浓度高于最高标准品时，需使用零标准品进一步稀释，计算时乘以稀释因子。稀释方法如下：

A  1：10    10ul血清样品+90ul 零标准品（充分混合）

B  1：100   10ul稀释液A +90ul零标准品（充分混合）

 【检测方法】

试剂准备

洗涤液：用900ml蒸馏水将100ml洗涤浓缩液稀释成1000ml最终体积。室温下2周稳定。

检测步骤

1) 将所需数量的板条置于板架上

2) 将20μL标准品、质控品和样品分别加入到微孔板相应的微孔中。

3) 在每一微孔中加入100μL酶联物，充分混合10秒，在这一步骤中充分混合非常重要

4) 室温下温育60分钟

5) 倒去孔内反应液，每孔加入250μL洗涤液洗板3次，吸水纸上拍干

6) 每孔加入100μL的底物液

7) 室温下温育15分钟

8) 每孔加入100μL终止液终止反应

9) 15min之内用酶标仪检测。

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