白喉抗体检测试剂盒（测总抗）

白喉是由白喉棒状杆菌引起的急性传染病，也是一种古老的传染病。20世纪30年代，白喉类毒素主动免疫逐渐开展起来，使白喉的发病率显著下降，1978年WTO开始推行扩大计划免疫，全球白喉发病率进一步下降。目前，有些国家如美国已无白喉病例，中国近几年也未发现白喉病例，但在部分国家如非洲一些国家以及中国周边一些国家还存在白喉病例及爆发、流行，仍有国外输入以及国内疫情复燃的可能，了解并加强白喉的实验室诊断技术十分必要。

【试剂准备】

将所有的试剂和样本平衡至室温(20-25°C)，并在开始测试运行前进行混合是非常重要的！

洗涤液

用蒸馏水根据1+19稀释洗涤浓缩液，例如，10 mL洗涤浓缩液+190mL蒸馏水混合。稀释的洗涤液在室温下（20-25℃）可保存5天，如果在浓缩液中出现晶体，则将溶液加热至37°C，例如在水浴中。稀释前搅拌均匀。

底物液

试剂为即用型，不需要稀释。必须储存在2-8°C，避光。溶液应该是无色的，或者可以有一个轻微的蓝色色调。如果基质变成蓝色，它可能已经被污染了，应该被扔掉。

【样本采集和制备】

使用人血清或血浆（柠檬酸、肝素）样本。如果在样本采集后5天内进行检测，样本应保持在2-8°C；否则应分装并深度冷冻保存(-70至-20°C)。如果样本是冷冻保存的，在检测前将解冻的样本混合。避免反复冻结和解冻。不建议对样本进行热失活。

样本稀释

检测前，所有样本应用IgG样本稀释缓冲液稀释1+100。将10µL样本和1 mL IgG样本稀释缓冲液加入试管中，涡旋混匀。

检测步骤

1）加100µL标准品或质控品和稀释的样本至相应的微孔中，保留A1为空白对照。

2）用提供的封板纸封板。

3）37± 1 °C孵育1小时± 5 分钟。

4）弃掉微孔中的内容物，用稀释的洗涤液冲洗孔3次(每次每孔300µL)。洗涤和吸入的时间间隔应>5s。在吸收性纸上用力击打微孔板，以去除残留的液滴。

5）加100µL酶联物至每个微孔中，除了空白孔。

6）室温下（20-25℃）避光孵育30分钟。

7）重复洗涤步骤。

8）加100µL底物液至每个微孔中。

9）在黑暗环境中室温下孵育15分钟。

10）加100µL终止液至每个微孔中。

11）在加入终止液溶液后的30分钟内，用酶标仪读取在450/620nm处的吸光度

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