通用名称:抗精子抗体IBL试剂盒(酶联诊断)
英文名称:Spermatozoa-Ab ELISA
产品规格:96T
产品货号:RE52001
产品品牌:德国IBL
注册证号:国械注进20142405077
抗精子抗体试剂盒(酶联免疫法)
抗精子抗体IBL试剂盒(酶联诊断)是科润达生物公司提供的进口试剂盒,有注册证,可用于临床使用。抗精子抗体试剂盒采用的是ELISA检测方法,该方法检测时间较短,操作起来简单方便,无需特殊仪器,本产品的灵敏度高、特异性强,最多可同时检测96人份,可更多的节约时间成本,此外公司还提供代测服务,并且提供完整的数据报告。抗精子抗体(AsAb)是一个复杂的病理产物,男女均可罹患。男性的精子、精浆,对女性来说皆属特异性抗原,接触到血液后,男女均可引起免疫反应,产生相应的抗体,阻碍精子与卵子结合,而致生育方面的困扰。
预期用途:用于人血清中抗精子表面抗原自身抗体体外定性检测。可用于临床使用。
背景简介
在西方国家,不孕夫妇的比例占总人群的10~15%(Haas et al,1980)。目前人们还不能精确的知道由免疫学因素导致不孕的发病率是多少。由于有很多不同的检测方法,人们对抗精子抗体在不孕中的作用存在着很大争议。在检测抗精子抗体的传统检测方法中,精子凝集检测和精子固定检测已被广泛应用。这些方法及其它凝集检测都很耗费时间,并且结果与其操作不协调。与传统的检测方法相比,用ELISA检测抗精子抗体具有很多优点。IBL公司的抗精子抗体ELISA试剂盒结合这些优点,并同时还具有高灵敏度和高特异性的特点。
检测原理
抗精子抗体IBL试剂盒(酶联诊断)利用的是非竞争性的原理。包被在微孔中的精子表面抗原是从池子中提取到的,它采用的方法是Alexander在1984年所提及到的那种方法。将疑似免疫学不孕病人的血清(已稀释好)加入到包被孔中温育,之后洗板,再加入过氧酶标记的抗人免疫球蛋白(IgA,IgG和IgM)并温育。温育后洗板,再加入TMB底物液,并酶标仪检测所显示的颜色强度。微孔中所显示的颜色强度与结合的免疫球蛋白浓度成正比。实验结果可从标准曲线上读取,结果单位为units/ml。
试剂盒组成成分
名称 | 数量 | 成分 |
微孔板 | 12×8孔 | 微孔中包被了精子表面抗原。 |
标准品 | 3支冻干粉 | 将每支冻干粉溶解于1ml的洗涤液中。重新配制好的标准品(标准品S5)100μl内含500mU抗精子抗体。 |
酶联物 | 100μl | 601倍浓缩,内含HRP标记的抗人IgG、IgA、IgM,使用前用稀释液按1:601的比例进行稀释。 |
底物液 | 12ml | 即用 |
终止液 | 12ml | 即用 |
洗涤液 | 50ml | 20倍浓缩,用双蒸水按1:20的比例稀释,配置好的洗涤液在2-8℃的环境下可稳定存放4周。 |
稀释液 | 3瓶冻干粉 | 将每瓶溶于20ml洗涤液中制成稀释液。 |
质控血清 | 3瓶冻干粉 | 将每瓶溶于1ml洗涤液中。 |
储存条件
抗精子抗体IBL试剂盒(酶联诊断)应当2~8℃的环境下运输。微孔板条一但被拆开,应当将其重新密封好。拆开了板条储存于2~8℃的环境下时,其免疫活性可稳定6周。
样本要求
按照一般原则进行静脉采血。不要使用明显溶血、黄疸血和脂血样品。采集的样品存放于2~8℃的环境下时,必须在24小时内将其检测掉。如果想将血清存放更长时间,可以将血清冻存于-20℃的环境下,避免反复冻融。
用稀释液将病人样品按1:51的比例进行稀释(例如:10μl样品+500μl稀释液),混合均匀。稀释好的样品于2~8℃下可保存24小时。
检验方法
实验开始前将所需数目的板条和所有试剂都平衡到室温。试剂盒可分3次进行检测,下面所述体积可用来检测4条包被板条(32个检测孔)。如果实验中需使用更多板条,则体积应当相应的进行改变。
洗涤液
将30ml浓缩的洗涤液中加入到600ml双蒸水中。配置好的洗涤液在2-8℃的环境下可稳定存放4周。冷藏时溶液会出现磷酸盐沉淀物,室温下又会溶解。
稀释液
每支冻干的稀释液中加入到20ml即用型的洗涤液中。配置好的稀释液在2-8℃的环境下可稳定存放2天,如果冻存于-20℃的环境下则可存放更长时间。标准品、质控血清
检测步骤
1、加100μl标准品、质控品和样本于相应反应孔中
2、封板后37℃温育60分钟。
3、每孔用250μl洗涤液洗板3次(建议您使用洗板机),吸水纸上拍干。
4、在每一微孔中加入100μl酶联物。
5、封板后37℃温育60分钟。
6、每孔用250μl洗涤液洗板3次
7、在每一微孔加TMB底物液100μl。
8、室温(18℃~24℃)温育10-15分钟。
9、每孔加100μl终止液以终止底物反应,轻轻振板以使溶液混合均匀。
10、加终止液后30min内在450nm读取OD值。(参照波长:600~650nm)
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