人半乳糖凝集素3检测试剂盒（ELISA法）

产品详情

预期用途
人半乳糖凝集素3检测试剂盒可用于人血清，血浆或细胞培养上清液中半乳糖凝集素3的定量检测。仅用于科研使用。

检测原理

人半乳糖凝集素3ELISA检测试剂盒，使用包被有人Galectin-3特异性抗体的96孔板。将标准品和样品加入到孔中，样品中存在的Galectin-3通过固定的抗体与板孔结合。洗涤板孔并加入生物素化的抗人Galectin-3抗体， 洗去未结合的生物素化抗体后，将HRP-缀合的链霉抗生物素蛋白加入到孔中。再次冲洗板孔，向孔中加入TMB底物溶液，其与所结合的Galectin-3的量成比例地显色。 终止液将溶液颜色从蓝色变为黄色，并且在450nm处测量吸光度。

人半乳糖凝集素3检测试剂盒组成成分

实验所需材料（未提供）
1.能够测量450 nm处吸光度的酶标仪。
2.提供2μl至1 ml体积的精密移液管。
3.可调1-25毫升移液器用于试剂制备。
4．100毫升和1升刻度量筒。
5. 吸水纸。
6. 蒸馏水或去离子水。
7.双对数做图纸或计算机和软件进行ELISA数据分析。
8.准备标准品或样品稀释液的管子。

试剂盒检测步骤
1、使用前将人半乳糖凝集素3ELISA检测试剂盒和样品置于室温（18 - 25ºC）。建议所有标准和样品至少重复一次。
2、根据您的实验标记可拆卸的8孔条。
3、分别加入样品和每个标准品100μl（参见试剂制备步骤3）到适当的板孔中。盖上盖子，室温温和振荡孵育2.5小时
4、弃去溶液，用1X洗涤液洗涤4次。使用多通道移液器或自动洗板机洗板，每孔加入洗涤缓冲液（300μl）。每个步骤中去除液体对于良好的性能是至关重要的。洗完后，通过吸取或倾析清除任何剩余的洗涤缓冲液。倒置板并用干净的吸水纸吸干印迹。
5、每孔加入100μl1X制备的生物素化抗体（试剂制备步骤6）。在室温下温和振荡孵育1小时。
6、弃去溶液。重复洗涤，如步骤4。
7、加入100μl制备的链霉亲和素溶液（见试剂制备步骤7）。在室温下温和摇动孵育45分钟。
8、弃去溶液。 重复洗涤，如步骤4。
9、向每个孔中加入100μlTMB一步底物试剂（项目H）。在室温下在黑暗中轻轻振荡孵育30分钟。
10、向每个孔中加入50μl终止液（项目I）。 立即读取450 nm处吸光度值。

扫码关注微信公众号，了解更多精彩资讯！