登革热IgM捕获法ELISA试剂盒
产品名称:登革热IgM捕获法ELISA试剂盒
英文名称:Dengue IgM capture ELISA kit
登革热IgM捕获法ELISA试剂盒预期用途
美国Inbios登革热IgM检测试剂盒是一种用来定性检测人是否感染登革热病毒的ELISA检测系统,它可以检测出人血清中是否存在抗登革热病毒源性重组抗原(DENVRA I-IV)的IgM抗体。此诊断实验可辅助诊断人是否感染了登革热病毒。此试剂盒不能用于筛查血液或血液成分,仅供体外诊断用。
登革热IgM捕获法ELISA试剂盒检测原理
美国Inbios登革热IgM检测试剂盒是由一种酶联扩大的两步法免疫检测系统。在此实验中,将登革热检测阴性质控(代表不反应的血清)、阳性质控和未知抗体浓度的血清样品加入到包被了抗人IgM抗体的微孔中温育,之后分别加入登革热源性重组抗原DENVRA(I-IV)和正常细胞抗原(NCA)进行温育。登革热IgM试剂盒的血清样品必须用样品稀释液进行稀释。温育并洗板后,用HRP标记的DENVRA(I-IV)特异性抗体处理。第二次温育并洗板后,加入TMB底物液进行温育。之后再加入酸性终止液,450nm处测OD值可确定底物反应的程度。当高于一定数值时(临界值),样品的吸光度值可确定样品中是否存在登革热抗体。
注意:阴性质控和弱阳性质控以内在质控形式提供,其目的是为了监测试剂盒成分的完整性。
登革热IgM捕获法ELISA试剂盒组成成分
1、抗人IgM包被的包被板:带板盖的板架,抗人IgM包被的96孔包被板。抗人IgM包被的微孔可捕获人样品中的IgM抗体。
2、样品稀释液:1瓶,25ml,含吐温20的Tris-HCl缓冲液,0.05%的Proclin-300防腐剂。用于试验样本,阴性质控和阳性指控的稀释
3、即用型的登革热重组抗原:1瓶,3ml,含吐温20的Tris-HCl缓冲液,0.05%的Proclin-300防腐剂
4、即用型正常细胞抗原(NCA):1支,3ml,含吐温20的Tris-HCl缓冲液,0.05%的Proclin-300防腐剂,COS-1细胞上清。
5、登革热检测阴性质控:1支,50ul的阴性血清,登革热检测阴性质控可辅助监测试剂盒的完整性。
6、登革热检测阳性质控:1支,50ul的阳性血清,登革热检测弱阳性质控可辅助监测试剂盒的完整性。
7、10倍浓缩洗涤液:1瓶,120ml,含吐温20的磷酸缓冲盐
8、HRP标记的即用型酶联物,1瓶,6ml,HRP标记的黄热病毒活性单克隆抗体,含吐温20的Tris-citrate缓冲液,<0.01%的硫柳汞防腐剂和添加剂
9、TMB底物液:1瓶,9ml,2-8℃下储存,有效期内稳定。注意:底物液必须始终储存于避光试剂瓶中。
10、终止液:1瓶,内含6ml即用型的终止液
登革热IgM捕获法ELISA试剂盒实验所需器材但试剂盒不提供
■可在450nm处读数的酶标仪
■生物学或高纯度水
■真空泵
■洗板机
■1-10ul的单道移液器,50-200ul的单道和多道移液器。
■聚丙烯试管
■Parafilm封口膜
■计时器
■旋涡混合器
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