人淀粉样蛋白β(Aβ)酶免试剂盒
产品详细
中文名称 | 人淀粉样蛋白β(Aβ)(1-x) |
英文名称 | Human amyloid β (Aβ) (1-x) |
产品货号 | 27729 |
产品规格 | 96T |
检测样本 | EDTA-血浆,脑脊髓液,血清,细胞上清或脑组织提取液 |
适应物种 | 人 |
预期用途 | 用于EDTA-血浆,脑脊髓液,血清,细胞上清或脑组织提取液中人Aβ(1-x)的定量检测 |
产品品牌 | 日本IBL |
供应商家 | 深圳市科润达生物工程有限公司 |
实验原理
人β淀粉样蛋白试剂盒(Aβ)1-40-老年痴呆,此试剂盒是一种夹心法的ELISA试剂盒,使用了两种高特异性的抗体。TMB作为显色剂,终溶液所显示的颜色强度与样品中Aβ(1-40)的量成正比。
检测范围
7.81~500pg/mL(1.8~115.5pmol/L,Aβ(1-40)分子量为4331)
试剂盒预期用途
人β淀粉样蛋白试剂盒(Aβ)1-40-老年痴呆,仅供研究使用,不能用于诊断,此试剂盒用于EDTA-血浆,脑脊髓液,血清,细胞上清或脑组织提取液中人Aβ(1-x)的定量检测,血清中的Aβ(1-x)非常不稳定,检测值会不会减少则取决于保存条件,如果上清样品中含有胎牛血清(FCS),那么FCS内的Aβ(1-x)可能会被检测到,建议设置一阴性质控,天然和重组的人Aβ(1-x)都可用此试剂盒检测。
试剂盒组成成分
1.微孔板,96T,包被有抗人Aβ(N)(82E1)小鼠IgG单抗
2.标记抗体浓缩,30X,0.4ml,HRP标记的抗人Aβ(11-28)小鼠IgG 单抗
3.标准品,0.5ml,2支,人Aβ(1-40)
4.EIA缓冲液,30ml,1%的BSA,含0.05%的吐温20的PBS
5.标记抗体稀释液,12ml,1%的BSA,含0.05%的吐温20的PBS
6.着色剂,TMB,15ml
7.终止液,1N硫酸,12ml
8.洗涤缓冲浓缩液,40X,50ml,0.005%吐温20的磷酸缓冲液
试验所需材料但试剂盒未提供
■酶标仪(450nm)
■移液器和枪头
■有刻度的烧杯和量筒
■蒸馏水
■冰箱(4℃)
■坐标纸(对数-对数)
■吸水纸
■标准品稀释管
■洗瓶
■一次性试验管
实验步骤
使用前,所有样品应平衡至室温,大约30min,然后充分混匀,确保试剂质量无变化,标准曲线和样品检测同时进行
试剂 | 检测样品 | 标准品 | 检测样品对照孔 | 试剂对照孔 |
检测样品 100ul | 稀释标准品(1-7管)100ul | EIA缓冲液(第8管) 100ul | EIA缓冲液100ul | |
盖板,4℃下温育过夜 | ||||
洗板7次 | ||||
酶标抗体 | 100ul | 100ul | 100ul | - |
盖板,4℃下温育60min | ||||
洗板9次 | ||||
显色剂 | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul |
室温避光温育30min | ||||
终止液 | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul |
加终止液后30min内450nm处读取OD值 |
1.确定好空白对照孔,并在相应的微孔中加入100ul EIA缓冲液。
2.确定好样品对照孔,检测样品孔和标准品孔,然后分别将100ul样品对照品、检测样品和稀释好的标准品加入到相应的微孔中。
3.盖板,4℃下温育过夜
4.用洗涤瓶洗板,在微孔中加入洗涤液浸泡15-30秒,弃去洗涤液。重复7次,后在吸水纸上拍干。如果是用洗板机洗板时,用洗板机洗四次后,再用洗涤瓶洗3次。
5.每孔加100ul酶标抗体,除试剂空白对照孔外
6.盖板,4℃下温育60min
7.按照步骤4)洗板9次
8.将所需量的显色剂加入到试管中,然后在每一微孔中加入100ul显色剂。为了避免污染,请勿将剩余试剂在倒入原装试剂瓶中。
9.室温避光温育30min,加入显色剂后溶液颜色会变成蓝色
10.在每孔加100ul终止液,此时溶液颜色会变成黄色
11.擦去微孔板底部的污点或水滴,终止液加入后30min内,在酶标仪450nm处读数
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