人可溶性α–klotho蛋白酶免试验
人可溶性α–klotho蛋白试剂盒产品详细
中文名称 | 人可溶性α–klotho蛋白试剂盒 |
英文名称 | Human soluble alpha-klotho protein kit |
产品货号 | 27998 |
产品规格 | 96T |
检测样本 | 血清、血浆、尿液 |
适应物种 | 人 |
预期用途 | 可用于血清,血浆和尿液中人可溶性α–klotho的定量检测 |
产品品牌 | 日本IBL |
供应商家 | 深圳市科润达生物工程有限公司 |
试剂盒实验原理
人可溶性α–klotho蛋白检测试剂盒根据酶免法的夹心原理,利用两种不同的高特异性抗体,TMB作为着色剂,颜色强度与人可溶性α–klotho的量成正比
试剂盒检测范围
93.75~6000pg/mL
试剂盒预期用途
人可溶性α–klotho蛋白检测试剂盒可用于血清,血浆和尿液中人可溶性α–klotho的定量检测。
人可溶性α–klotho蛋白试剂盒组成
名称 | 数量 | 成分 |
包被板 | 96孔 | 包被有抗人可溶性α–klotho(67G3)小鼠IgG单抗,亲和纯化 |
标记抗体浓缩30X | 0.4mlx1 | HRP标记的抗人可溶性α–klotho小鼠IgG Fab’,亲和纯化 |
标准品 | 0.5mlx2 | 重组人可溶性α–klotho |
EIA缓冲液 | 30mlx1 | |
标记抗体稀释液 | 12mlx1 | 1%BSA,含0.05%吐温20的PBS |
着色剂 | 15mlx1 | TMB底物液 |
终止液 | 12mlx1 | 1N硫酸 |
洗涤缓冲浓缩液 40X | 50mlx1 | 含0.05%吐温20的磷酸缓冲液 |
人可溶性α–klotho蛋白检测实验所需材料但试剂盒未提供
■酶标仪(450nm)
■移液器和枪头
■烧杯
■蒸馏水
■孵箱(37±1℃)
■坐标纸(对数-对数)
■吸水纸
■标准品稀释管
■洗瓶
■一次性试验管
人可溶性α–klotho蛋白试剂盒实验步骤
使用前,所有样品应平衡至室温,大约30min,然后充分混匀,确保试剂质量无变化,标准曲线和样品检测同时进行
试剂 | 检测样品 | 标准品 | 检测样品对照孔 | 试剂对照孔 |
检测样品100ul | 稀释标准品(1-7管)100ul | EIA缓冲液(第8管) 100ul | EIA缓冲液100ul | |
盖板,室温下温育60min | ||||
洗板4次 | ||||
酶标抗体 | 100ul | 100ul | 100ul | - |
盖板,室温下温育30min | ||||
洗板4次 | ||||
显色剂 | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul |
室温避光温育30min | ||||
终止液 | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul |
加终止液后30min内450nm处读取OD值 |
1.确定好空白对照孔,并在相应的微孔中加入100ul EIA缓冲液。
2.确定好样品对照孔,检测样品孔和标准品孔,然后分别将100ul样品对照品、检测样品和稀释好的标准品加入到相应的微孔中。
3.盖板,室温下温育60min
4.在微孔中加入350ul以上的洗涤液,浸泡15-30秒,弃去洗涤液。重复4次,后在吸水纸上拍干;
5.每孔加100ul酶标抗体,除试剂空白对照孔外
6.盖板,室温下温育30min
7.按照步骤4)洗板5次
8.将所需量的显色剂加入到试管中,然后在每一微孔中加入100ul显色剂。为了避免污染,请勿将剩余试剂在倒入原装试剂瓶中。
9.室温避光温育30min,加入显色剂后溶液颜色会变成蓝色
10.在每孔加100ul终止液,此时溶液颜色会变成黄色
11.擦去微孔板底部的污点或水滴,终止液加入后30min内,在酶标仪450nm处读数
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