人磷酸化Tau蛋白检测试剂盒(ELISA)
检测试剂盒产品详细
中文名称 | 人磷酸化Tau蛋白检测试剂盒 ELISA |
英文名称 | Human Phospho Tau(181P) Assay Kit ELISA |
产品货号 | 27812 |
产品规格 | 96T |
检测样本 | 人脑脊液 |
适应物种 | 人 |
预期用途 | 用于检测人脑脊液里磷酸化Tau蛋白定性检测。 |
产品品牌 | 日本IBL |
供应商家 | 深圳市科润达生物工程有限公司 |
elisa试剂盒预期用途
人磷酸化Tau蛋白elisa试剂盒(老年痴呆)用于检测人脑脊液里磷酸化Tau蛋白定性检测,仅供科研用,不用于临床诊断。
试剂盒成分
96T x 1 | 预包被板 |
0.4mL x 1 | 酶标记抗体: (30倍浓缩)HRP标记抗人Tau p181-RK27A6 小鼠IgG Fab’) |
0.5mL x 2 | 标准品:重组人Tau441 |
30mL x 1 | EIA缓冲液 |
12mL x 1 | 标记抗体稀释液 |
15mL x 1 | 显色剂 |
12mL x 1 | 终止液 |
50mL x 1 | 浓缩洗涤液 |
检测试剂盒检测原理
人磷酸化Tau蛋白elisa试剂盒(老年痴呆)是固相夹心ELISA(酶联免疫吸附测定)。当将*抗体包被在平板上时,将样品和标准品加入到板孔中进行*次反应。 反应后,加入HRP-缀合的二抗进入板孔进行第二次反应。 冲洗掉未结合的二抗后,将四甲基联本胺(TMB)加入孔中并显色。
Tau蛋白检测实验所需器材(但试剂盒没有提供)
★ | 酶标仪 |
★ | 微移液管及其枪头 |
★ | 量筒及烧杯 |
★ | 去离子水 |
★ | 冰箱(4°C) |
★ | 坐标纸(log/log) |
★ | 吸水纸 |
★ | 试管(用于标准品稀释) |
★ | 洗瓶 (用于洗板) |
★ | 孵育器(37±1℃) |
★ | 一次性试剂管(用于浓缩酶标记抗体和显色剂) |
试剂盒储存条件
人磷酸化Tau蛋白检测试剂盒在2-8℃保存,有效期见试剂盒外包装。
检测试剂盒实验步骤
使用前,将所有试剂应平衡至室温,大约30min,充分混匀,确保试剂质量无改变,标准曲线和样品检测必须同时进行.
1.确定样本空白孔,并加入100ulEIA缓冲液。
2.确定样本孔和标准品孔,样本和标准品(管1-7)100ul分别加入相应的孔中
3.盖板,*次孵育,
4.洗板,按照前述“操作注意事项"中第8-9条进行。使用稀释好的洗涤液,后在吸水纸上*拍干。
5.将每孔中加入100ul 准备好的标记抗体
6.盖板,第二次孵育
7.洗板,按照前述“操作注意事项"中第8-9条进行。使用稀释好的洗涤液,后在吸水纸上*拍干。
8.取需要量的底物液到一次性检测管中,每孔加入100ulTMB溶液。为了避免污染,检测管中剩余的底物液不得再次放回原底物液瓶中。
9.黑暗中室温孵育30min,颜色变蓝。
10.每孔加入100ul 终止液终止反应,通过点击板的一面来混合板内溶液,此时颜色变为黄色。
11.读取OD值:将板底污物清除,并保证板孔内无气泡,以空白孔为对照进行标准品和样本的测量。测量在450nm处进行,参考波长600-650nm,测量应在终止液加入后30min内进行。
试剂盒检测步骤表格如下
试剂 | 待检测样品 | 标准品 | 样品空白 |
检测样品100ul | 稀释标准品(1-7管)100ul | EIA缓冲液 | |
盖板,2-8°C下温育过夜 | |||
洗板4次(每孔加洗涤液不少于350ul,按操作注意事项中的8和9条进行 | |||
酶标抗体 | 100ul | 100ul | 100ul |
盖板,2-8°C下温育30min | |||
洗板5次(每孔加洗涤液不少于350ul,按操作注意事项中的8和9条进行 | |||
底物液 | 100ul | 100ul | 100ul |
室温避光温育30min | |||
终止液 | 100ul | 100ul | 100ul |
加终止液后,30min内于450nm/600-650nm处读取OD值, |
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