大鼠总血管紧张素原ELISA检测试剂盒(细胞因子)
中文名称 | 大鼠总血管紧张素原 ELISA检测试剂盒 |
英文名称 | Rat total angiotensinogen ELISA test kit |
产品货号 | 27414 |
产品规格 | 96T |
检测样本 | 大鼠血清,EDTA血浆,尿液,细胞上清 |
适应物种 | 大鼠 |
预期用途 | 用于大鼠血清,EDTA血浆,尿液,细胞上清中血管紧张素原的定量检测 |
产品品牌 | 日本IBL |
供应商家 | 深圳市科润达生物工程有限公司 |
试剂盒原理
大鼠总血管紧张素原试剂盒(细胞因子)运用了两种特异性抗体,洗板后加入TMB底物液显色,显色的强度与大鼠血管紧张素原的量成正比.
检测范围
0.08 - 5.0 ng/mL
(1.5 – 96.2 pmol/L ,由于大鼠血管紧张素原的分子量为52 kDa)
预期用途
■大鼠总血管紧张素原试剂盒(细胞因子)能用于大鼠血清,EDTA血浆,尿液,细胞上清中血管紧张素原的定量检测. 如需稀释,请用EIA缓冲液稀释
■建议尿液样品的稀释约32倍
■建议血清和EDTA血浆样品稀释约2000倍
■细胞上清的稀释倍数随所选取的细胞不同而不同, 因此,具体稀释倍数视每个实验室优化而定.
大鼠总血管紧张素原试剂盒(细胞因子)
主要成份
名称 | 数量 | 成分 |
预包被板 | 96T | 抗大鼠血管紧张素原(135)兔子IgG,亲合纯化 |
酶标记抗体 | 0.4mL x 1 | (30倍浓缩)HRP标记抗大鼠血管紧张素原(405)兔子IgG,亲合纯化 |
标准品 | 1.0mL x 2 | 重组大鼠血管紧张素原 |
EIA缓冲液 | 30mL x 1 | 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS |
标记抗体稀释液 | 12mL x 1 | 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS |
显色剂 | 15mL x 1 | TMB底物液 |
终止液 | 12mL x 1 | 1N硫酸 |
浓缩洗涤液 | 50mL x 1 | (40倍浓缩) 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS |
实验所需器材(试剂盒内不提供)
★ | 酶标仪(450nm) 微移液管及其枪头 |
★ | 量筒及烧杯 去离子水 |
★ | 温育箱(37°C ± 1°C) 坐标纸(log/log) |
★ | 吸水纸 试管(用于标准品稀释) |
★ | 洗瓶 (用于洗板) |
★ | 一次性试剂管(用于浓缩酶标记抗体和显色剂) |
实验步骤
使用前,将所有试剂应平衡至室温,大约30min,充分混匀,确保试剂质量无改变,标准曲线和样品检测必须同时进行.
试剂 | 待检测样品 | 标准品 | 样品空白 | 试剂空白 |
检测样品100ul | 稀释标准品(1-7管)100ul | EIA缓冲液(第8管) 100ul | EIA缓冲液100ul | |
盖板,于37°C下温育60min | ||||
洗板7次 | ||||
酶标抗体 | 100ul | 100ul | 100ul | - |
盖板,于37°C下温育30min | ||||
洗板9次 | ||||
显色剂 | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul |
室温避光温育30min | ||||
终止液 | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul |
加终止液后,30min内于450nm处读取OD值 |
1. | 设试剂空白对照,并于相应的微孔中加入100ul EIA缓冲液 |
2. | 确定好样品空白对照孔,检测样品孔和标准品孔,分别将100ul样品对照品(8号管)、检测样品和稀释好的标准品(1-7号管)加入到相应的微孔中。 |
3. | 盖板,37°C下温育60min |
4. | 用洗涤瓶剧烈洗板,再加入稀释洗涤液,静置15-30秒,再*倒去孔内反应液 重复洗板7次. 后在吸水纸上拍干,去除残留液滴 如用自动洗板机洗板,先自动洗4次,再按上述用洗瓶手工洗3次 |
5. | 除试剂空白对照孔外,其余每孔各加100ul酶标抗体 |
6. | 盖板,37°C下温育30min |
7. | 按照上述步骤4)洗板9次 |
8. | 用一次性试管取所需量的显色剂,各加100ul显色剂于微孔中.为了避免污染,勿将剩余试剂在倒回试剂瓶中 |
9. | 室温避光温育30min,加入显色剂后溶液颜色会变成蓝色 |
10. | 每孔各加100ul终止液,溶液颜色会变成黄色 |
11. | 擦去微孔板底部的污迹或水滴,确保微孔内溶液无气泡产生.加入终止液后30min内于酶标仪 450nm处读取结果 |
12. |
存储与有效期
存储条件: 2 - 8°C
有效期见试剂盒外包装
本译文仅供参考,详情请以原文为准
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