斑点热群立克次体IgG ELISA试剂盒(酶联免疫法)
ELISA操作显色过程常见问题及解答
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 使用变质的显色剂。
3) 未使用完毕的显色剂返回原瓶造成污染
4) 显色反应不避光,或有阳光直射
解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用;
2) A、B 液应避免接触金属器械。
3) 使用量根据样本需要量取,取出后未使用完毕的显色液应弃去,不能再次返回原试剂瓶,以免造成显色液污染,影响下次使用;
4)TMB对光敏感,一般显色反应要避光进行;
斑点热群立克次体IgG ELISA试剂盒详细表
中文名称 | 斑点热群立克次体IgG检测试剂盒(酶联免疫法) |
英文名称 | Spotted fever Group Rickettsia EIA IgG Antibody Kit |
产品货号 | SFG-96k |
产品规格 | 96T |
检测样本 | 血清、血浆 |
适应物种 | 人 |
预期用途 | 用于人血清、血浆中抗斑点热群立克次体IgG的体外定性检测 |
产品品牌 | 美国fuller |
供应商家 | 深圳市科润达生物工程有限公司 |
斑点热群立克次体IgG检测试剂盒预期用途
斑点热群立克次体IgG检测试剂盒用于人血清、血浆中抗斑点热群立克次体IgG的体外定性检测。
斑点热群立克次体IgG检测试剂盒成分
名称 | 数量 | 成分作用 |
微孔板 | 12×8 | 包被有斑点热群立克次体外脂多糖抗原(rLPS) |
样品稀释液 | 2×50ml | 含牛血清蛋白及吐温20、Mercury sulfide的PBS缓冲液 即用型 |
酶联物 | 1×12ml | 辣根过氧化物酶标记的抗人IgG 即用型 避光保存 |
阳性质控 | 1×120μl | 1:10预稀释 |
临界质控 | 1×200μl | 1:10预稀释 |
阴性质控 | 1×120μl | 1:10预稀释 |
底物液 | 1×12ml | 琥珀色瓶,含TMB底物液以及Hydrogen peroxide 即用型 避光保存 |
终止液 | 1×12ml | 含稀释好的硫酸 即用型 避免接触皮肤 |
PBS缓冲液 | 吐温20 1×2ml | 将试剂盒提供的小包加入到1L蒸馏水中 以配置PBS缓冲液 加入到1L的PBS缓冲液中 配制成洗液。 |
斑点热群立克次体IgG检测试剂盒检测原理
斑点热群立克次体IgG检测试剂盒微孔板中包被有从斑点热群立克次体中提取出的脂多糖(rLPS)。病人血清用样品稀释液稀释,之后样品被加入到微孔中孵育。孵育过程中,血清抗体与微孔板抗原发生特异性结合。洗板洗去未结合的部分,之后加入酶标的抗人IgG。
孵育过后洗板,洗去未结合上的酶联物。之后加入酶底物液反应。形成蓝色,颜色的深度与样品中特异性IgG的浓度成正比。定时反应后,加入终止液,颜色变黄,微孔板使用酶标仪在450nm下读取吸光值。
斑点热群立克次体IgG实验检测所需材料(试剂盒内不提供)
★ | 蒸馏水 |
★ | 洗瓶 |
★ | 试管 |
★ | 移液器 |
★ | 粘性盖板 |
★ | 450nm读数酶标仪 |
斑点热群立克次体IgG检测试剂盒储存及稳定
斑点热群立克次体IgG检测试剂盒应2-8℃保存,在实验前应先平衡至室温(20-25℃)剩余的微孔板需密封保存在包装袋中。
斑点热群立克次体IgG检测试剂盒检测步骤
1. | 移取阳性质控、阴性质控、临界质控、样品各100μl到相应的微孔中,临界质控做双孔检测。 |
2. | 盖板,在室温下孵育60分钟 |
3. | 使用洗涤液洗板至少3次,并在吸水纸上拍干。 |
4. | 每孔加入100μl酶联物 |
5. | 盖板,在室温下避光孵育30分钟 |
6. | 洗板同步骤3 |
7. | 每孔加入100μl TMB底物液,暗光下准确孵育10分钟 |
8. | 每孔加入100μl终止液 |
9. | 使用酶标仪在450nm波长下读取吸光值 |
斑点热群立克次体IgG检测试剂盒检测期望值
由于地域及检测人口的不同,检测值也会存在差异。在病区中,症状不明显或者只出现轻微症状的病人的检测,血清阳性率约为1%~26%。
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