降钙素试剂盒（酶联免疫检测法）

ELISA方法操作孵育过程常见问题及解答
1） 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*；
2） 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。

3）孵育温度未按照说明书要求进行，温度过高或过低；
解决办法：
1） 贴封片或加盖；
2） 按说明步骤严格控制操作时间和孵育温度。

通用名称：降钙素试剂盒（酶免法）
英文名称：Calcitonin ELISA
产品货号：NM59011
产品规格：96T
检测样本：血清
公司品牌：德国IBL
储存条件：2-8℃
检测方法：ELISA方法
预期用途：可用于人血清中降钙素的定量检测
参考价格：询价
供应商家：深圳市科润达生物工程有限公司

预期用途
此降钙素检测试剂盒可用于人血清中降钙素的定量检测。

检测原理
此试剂盒采用双位点酶免法检测降钙素完整的32氨基酸链。利用两种不同的人降钙素小鼠单抗，生物素标记的抗体结合降钙素11-23的氨基酸，另外一个HRP标记的抗体结合21-32的氨基酸。实验中，标准品，质控品或病人样品与两标记抗体同时加入至包被有链霉亲和素的包被孔内温育。

样本中的降钙素则会夹在两抗体间，温育结束后，洗去未结合成分，然后再加入底物液温育，终止液加入终止反应，溶液颜色变为黄色，样本中降钙素的量与颜色的强度成正比，以标准品的吸收值和浓度做标准曲线，则样本浓度可直接从标准曲线获得

试剂盒组成成分
●微孔板——12×8——即用型、包被有链亲和霉素
●试剂1——1×7.0ml——即用型、含生物素标记的降钙素抗体
●试剂2——1×7.0ml——即用型、含HRP标记的降钙素抗体
●试剂3——1×10.0ml——即用型、含EDTA的配制液
●试剂A——1×30.0ml——20倍浓缩洗涤液
●试剂B——1×20.0ml——即用型、含TMB
●质控品1+2——2×——冻干品、具体浓度见瓶身标签
●标准品A~F——6×——冻干品、具体浓度见瓶身标签
●终止液——1×20.0ml——即用型、含1N硫酸

降钙素检测所需材料（试剂盒内不提供）
●移液器，50,100和150ul体积
●振荡器
●8-通道移液器
●洗瓶，自动或半自动洗板机
●酶标仪
●去离子水或蒸馏水
●吸水纸，枪头，计时器

储存条件
降钙素检测试剂盒应当在2~8℃运输和储存，避免高温和阳光直射。

检测步骤
●标准品，质控品和样本吸取100ul至相应的孔内，剩余的标准品和质控用完后立即放回至-20℃冻存，不能储存在自动除霜冻存机内
●每孔加100ul的试剂1
●每孔加50ul的试剂2
●盖板，170±10rpm，室温下（18-25℃）温育4小时±30分钟
●倒去孔内溶液，用工作洗涤液洗板5次，如果用全自动洗板机，则每孔加350ul的洗液洗涤
●每孔加150ul的试剂B（TMB底物液）
●盖板，170±10rpm，室温下（18-25℃）温育30±5分钟
●每孔加100ul的终止液
●加入终止液10min内在酶标仪上读数，用250ul的去离子水校正450nm，同样的校正405nm

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