过敏原总IgEelisa检测试剂盒(酶联免疫法)

elisa操作洗板 过程常见问题及解答
1） 采用手工洗板， 孔与孔之间液体交叉。
2） 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。
3） 反应板过多造成洗板等待时间长。
解决办法：
1） 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后*在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干；
2） 合理安排，或多用几台洗板机。

3 )  手工洗板，每次加液后浸泡30s左右，保证洗板的效果。

通用名称：总IgE检测试剂盒（酶联免疫法）
英文名称：Total- IgE ELISA
产品货号：RE59061
产品规格：96T
检测样本：血清和血浆
公司品牌：德国IBL
储存条件：2-8℃
检测方法：ELISA方法
预期用途：可用于定量人检测血清、血浆中总的IgE抗体的含量
参考价格：询价
供应商家：深圳市科润达生物工程有限公司

IgE简介

人体中的IgE是一种特殊的免疫球蛋白，它是过敏反应的一种重要介导因素。反应的机制涉及到免疫活性的B淋巴细胞被特异性抗原所造成的抗原刺激。之后淋巴细胞产生几种类型的抗体，其中IgE抗体通过它的FC部分结合到肥大细胞以及嗜碱性白血球的表面受体上，再次接触到过敏原时，细胞表面绑定的IgE就会通过它们的Fab部分与过敏原结合。这一结合会引起肥大细胞以及嗜碱性白血球释放各种血管活性胺到血液以及周边组织中去。这些物质会引起平滑肌收缩并导致水痘、潮红、麻疹、鼻炎、皮炎、花粉热、哮喘以及过敏性休克。IgE检测可有效的用于诊断已知或怀疑患有过敏性疾病的病人。正常情况下，IgE的值与年龄有关，并且在10-14岁急剧增加。有家族遗传性过敏疾病的婴儿及儿童有很高的风险会患有疾病，因此他们是主要的筛查对象。研究显示哮喘、鼻炎、湿疹、荨麻疹、皮炎以及一些虫感染都有可能增加IgE水平。哮喘、花粉热以及特异性湿疹病人会比正常病人IgE水平高出3-10倍。

试剂盒检测原理

过敏原总IgEelisa检测试剂盒采用酶联免疫吸附法。微孔板上包被有单克隆的小鼠抗人IgE抗体。病人血清以及标准品加入到微孔中后，与之后加入的抗人IgE辣根过氧化酶结合物一同孵育。最后血清中的IgE与两种抗体形成夹心复合物。洗板后加入TMD底物液孵育15分钟，之后加入终止液显出黄色。之后在450nm读取吸光值，结果会与IgE浓度成正比。

总IgEelisa试剂盒预期用途

总IgE检测试剂盒可用于定量人检测血清、血浆中总的IgE抗体的含量。可进一步应用与其他体液的检测，如有需要请联系IBL的技术人员。

总IgE检测试剂盒组成
●1×12×8——微孔板——包被有单克隆抗IgE抗体
●1×1ml-1×5×0.2ml——标准品A-F——标准品A 1mL
含量0、5、25、100、250、1000U/ml 含人血清PBS稀释液 1%叠氮化呐
●20ml——酶联物——羊抗IgE抗体与辣根过氧化酶结合物、蛋白缓冲液
●15ml——底物液——含TMB
●15ml——终止液——0.5M 硫酸
●60ml——洗涤液——10倍浓缩
●2 x——封板纸
●1 x——自封袋

总IgE检测试剂盒检测所需材料（试剂盒内不提供）
●10μl、200μl、500μl移液器
●酶标仪
●洗板机
●试管
●蒸馏水

总IgE检测试剂盒检测步骤
●选取好足够数量的板条，放置在架子上。
●每个对应的孔中加入10μl样品、标准品，然后每个孔加入200μl酶联物。留一个孔做空白对照
●盖板，在室温下温育30分钟
●清空微孔，用300μl洗液洗3次
●每个孔加100μl底物液，室温避光温育15分钟
●每孔加入100μl终止液
●60分钟内在450nm下读数（参照波长620nm）

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