腮腺炎IgMelisa说明书
ELISA操作显色过程常见问题及解答
1)显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2)使用变质的显色剂。
3)未使用完毕的显色剂返回原瓶造成污染
4)显色反应不避光,或有阳光直射
解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用;
2) A、B 液应避免接触金属器械。
3) 使用量根据样本需要量取,取出后未使用完毕的显色液应弃去,不能再次返回原试剂瓶,以免造成显色液污染,影响下次使用;
4)TMB对光敏感,一般显色反应要避光进行;
通用名称:腮腺炎IgM检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名称:Mumps virus (parotitis) IgM ELISA
产品货号:RE56651
产品规格:96T
检测样本:血清和血浆
公司品牌:德国IBL
储存条件:2-8℃
检测方法:ELISA方法
预期用途:可用于人血清、血浆中腮腺炎IgM的定性和定量检测
参考价格:询价
供应商家:深圳市科润达生物工程有限公司
elisa说明书检测原理
腮腺炎病毒抗体elisa检测试剂盒RE56651利用的夹心法原理。微孔板上包被了抗原。用对人IgM具有特异性的酶标二抗来检测结合到包被抗原的样品特异性抗体。底物反应后,所显示的颜色强度与检测到的IgM特异性抗体的量成正比。样品的结果可直接使用标准曲线获得。
预期用途
腮腺炎病毒抗体elisa检测试剂盒RE56651可用于人血清、血浆中腮腺炎IgM的定性和定量检测。
腮腺炎病毒简介
腮腺炎是一种常见的传染病,儿童感染的症状相对较温和,成年人感染则越来越多的表现为并发症。腮腺炎的病原体是副黏液病毒科的一种病毒。腮腺炎感染或接种其疫苗都可产生终生免疫。腮腺炎的典型症状是腮腺肿大,而且还可能涉及到中枢神经系统和其它的腺体(胰腺、胸腺和甲状腺)。腮腺炎包括脑膜炎在内是腮腺炎病毒感染最常见的表现之一,而且脑膜炎在腮腺炎未出现的情况下也可以出现。已公布的关于脑膜炎的资料表明,脑膜炎的临床病例是1.4%到66%之间。大多情况下,腮腺炎感染的病人都会在不出现并发症的情况下逐渐康复。实验室中腮腺炎的鉴别大多通过检测病原体的本身或检测病毒的特异性抗体。其中血清学检测是主要的一部分。除了像补体结合实验、红细胞凝集实验、中和实验这样的传统方法外,现代的检测方法有免疫荧光、放免和酶免。我们可通过腮腺炎的IgM ELISA试剂盒来检测个体的免疫性。因为副流感病毒2的交叉反应可能导致病人的诊断报告错误,所以说IgM浓度的提高有助于病原体的检测。在疾病的早期阶段,我们可检测到较高的IgM浓度。
腮腺炎病毒elisa检测试剂盒组成成分
●微孔板——12×8——包被有特异性抗原
●标准品A~D——4×2ml——1;10;30;125U/mL,即用型
标准品A=阴性质控——标准品B=临界质控标准品C=弱阳性质控——标准品D=阳性质控
内含抗腮腺炎病毒的IgM抗体,PBS(磷酸缓冲液),稳定剂。
●酶联物——1×15ml——红色、即用型、内含辣根过氧化物酶标记的抗人IgM,蛋白缓冲液,稳定剂
●稀释液——1×60ml——含PBS缓冲液,<0.1%NaN3
●洗涤液——1×60ml——10倍浓缩、含PBS缓冲液、吐温20
●底物液——1×15ml——含TMB
●终止液——1×15ml——0.5M的H2SO4
●封板纸——2×——用于在温育时遮盖微孔板
●自封袋——1×——用于储存不用的板条
腮腺炎病毒IgM检测所需材料(试剂盒内不提供)
●RF吸附剂
●移液器,体积:5;50;100;500 µL
●校准仪
●样品稀释用试管(1ml)
●带试剂储器8道移液器
●洗涤瓶,自动或半自动洗板机
●能在450nm处读数的酶标仪
●双蒸水或去离子水
●吸水纸,取样吸头和计时器储存条件
●试剂盒运输环境和储存环境温度为2~8℃,避免热源或太阳直射。
腮腺炎病毒elisa说明书检测步骤
●加100µL标准品和已稀释样本于相应反应孔中,在定性检测中只使用标准品B。
●封板后室温(18℃~25℃)温育60分钟。
●移去封板纸,弃去孔中液体。用300µL洗涤液洗板3次,在吸水纸上拍干。
●在每一微孔中加入100µL酶联物。
●封板后室温(18℃~25℃)温育30分钟。
●移去封板纸,弃去孔中液体。用300µL洗涤液洗板3次,在吸水纸上拍干。
●加底物液和终止液时,如果有条件的话,可使用8孔微量移液器。确保底物液和终止液都是相同的时间间隔加入。使用确切容积并避免气泡产生。
●每孔加TMB底物液100µL。
●室温(18℃~25℃)避光温育20分钟。
●在每一微孔中加入100µLTMB终止液以终止底物反应。轻轻摇动微孔板以使试剂混合均匀。此时,颜色蓝色变成黄色。
●加终止液后60分钟内在450nm处测OD值。
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