β2微球蛋白ELISA检测试剂盒(酶联免疫法)
ELISA操作洗板过程常见问题及解答
1) 采用手工洗板, 孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。
解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后*在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
3)手工洗板,每次加液后浸泡30s左右,保证洗板的效果。
通用名称:β2微球蛋白检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名称:β2-Microglobulin ELISA
产品货号:EIA1789
产品规格:96T
检测样本:血清
公司品牌:德国DRG
储存条件:2-8℃
检测方法:ELISA方法
预期用途:用于人类血清中β2微球蛋白的体外定量检测
参考价格:询价
供应商家:深圳市科润达生物工程有限公司
β2微球蛋白ELISA检测试剂盒预期用途
β2微球蛋白检测试剂盒用于人类血清中β2微球蛋白的体外定量检测。
β2微球蛋白前言简介
β2微球蛋白(β2-MG)由人体有核细胞和许多肿瘤细胞系表达。人类β2微球蛋白是一种低分子量蛋白质(MW11600),由99个氨基酸组成的多肽单链。它是与人类白细胞抗原HLA-A,-B,-C主要组织相容性复合体抗原的轻链相同。在结构和氨基酸序列上,与IgG的CH3区域相似,虽然抗原性有区别。
β2微球蛋白通过肾脏代谢。在通过肾小球过滤后,由近端肾小管细胞通过内吞作用重吸收和分解。在正常个体的血清和尿液中β2微球蛋白的量很低。通常只有微量的β2微球蛋白通过尿液排泄,尿排泄量升高被解释为肾小管功能障碍的证据。肾小管间质性疾病和存在氨基糖苷类抗生素和抗炎药物联用时β2微球蛋白尿排泄量会显著的增加。
β2微球蛋白在上泌尿道感染和结缔组织病(如:类风湿性关节炎)以及休格林氏症综合症的病人尿液里排泄量也会增加。在正常肾小球过滤率,血清中β2微球蛋白浓度升高提示β2微球蛋白的产生或释放增强。在类风湿关节炎,系统性红斑狼疮,结节病和一些病毒性疾病包括巨细胞病毒,非A型和非B型肝炎和感染性单核细胞增多症的患者中,β2-MG血清水平与疾病活动有关。
β2-MG ELISA提供了一种灵敏可靠的测定人血清中β2-微球蛋白的测定方法。该试剂盒的标准品范围为0.625至10μg/ mL,将确定0.1μg/ mL的最小可检测浓度。该实验2小时内可出结果。
β2微球蛋白检测试剂盒检测原理
β2-MG ELISA测试是基于固相酶联免疫吸附测定(ELISA)的原理。实验系统利用单克隆抗β2微球蛋白抗体固相固定(微孔中)。羊抗β2微球蛋白抗体结合到酶(辣根过氧化物酶)标记物上。稀释的测试样本在37℃时先和固相抗体反应30分钟。然后加入羊抗-β2-MG-HRPO结合物37℃反应30分钟,使β2-MG分子夹在固相载体和酶标抗体之间。
洗板以去除未结合的酶标抗体,加入TMB溶液在室温下温育20分钟,使溶液变为蓝色。加入终止液(1N HCL)停止颜色反应,颜色变为黄色。
试验样本β2-MG浓度和颜色强度成正比,吸光值在450nm处测量。
β2微球蛋白检测试剂盒组成成分
●抗体包被板,96(孔),微孔中包被了鼠单克隆抗β2-MG抗体。
●酶联物,22ml,含辣根过氧化物酶标记的羊抗β2-MG抗体。
●标准品,6瓶,冻干粉,101倍预稀释后,含β2-MG抗体的浓度分别为:0,0.625,1.25,2.5,5,10ug/ml。
●样本稀释液,100ml,2% BSA缓冲液,含有防腐剂。
●TMB底物液,11ml,含稳定的3,3,,5,5,,-四甲基联本胺(TMB)缓冲液。
●终止液(1N HCL),11ml,含稀盐酸。
β2微球蛋白检测试剂盒储存条件
●未开封试剂盒在2~8℃储存至有效期,有效期参考包装标签。
●已开封试剂在2~8℃储存恰当可稳定至有效期。
●保持微孔板在含有干燥剂的密封袋里,以减少暴露于潮湿的空气中。
β2微球蛋白检测试剂盒检测步骤
●将所需数量的包被孔固定到板架上。
●将20ul的标准品、稀释样本和稀释质控加到相应的孔中。
●每孔加入200ul样本稀释液*的混匀30秒。*混匀非常重要。
●37℃温育30分钟。
●倒出孔内混合物并用去离子水或蒸馏水洗板5次(不能用自来水)。并在吸水纸上拍干。
●每孔加200ul酶联物,轻轻的混匀10秒。
●37℃温育30分钟。
●重复步骤5.
●每孔加入100ul TMB底物液,轻轻混匀10秒。
●室温避光温育20分钟。
●通过每孔加入100ul终止液终止反应。
●轻轻混匀10秒,这步非常重要确保所有的蓝色*的变成黄色。
●15分钟内用酶标仪(450nm)读数。
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