抗DNA及组织蛋白自身抗体
抗可提取性核抗原(ENA)抗体:史密斯抗原(Sm)、核糖核蛋白(RNP)、SSA、SSB、Scl-70,Jo-1 以及PM1
抗DNA及组织蛋白自身抗体包括了抗单链DNA及双链DNA(ssDNA及dsDNA)。抗双链DNA的显著水平被证实是诊断系统性红斑狼疮(SLE)的标志。抗组织蛋白抗体则暗示着药物引起的狼疮。
除了DNA及组织蛋白,自身抗体可能还会以其他核抗原为目标。这些核抗原被命名为可提取性核抗原,它们zui初是从细胞核的盐溶液中所提取出来的。抗史密斯抗原(Sm)是zui早被发现的ENA,被认为是与SLE有着高度的关联。随后,其他的ENA也逐渐被发现。
尽管大多数的ENA都是某些疾病所特异性拥有的,但是还是有明显的重叠存在。因此检测灵敏度及特异性很大程度上依赖于所潜在的CTD类型。
病人血清中自身抗体的存在构成了CTD诊断的标准。ANA子类型的区分可以与病人临床症状相结合,用于鉴别CTD的类型。
间接免疫荧光法(IF)以及酶联免疫法(ELISA)是ANA检测的日常手法。zui初,筛查应该由ANA-IF进行初步的检测。如果存在阳性结果,那就应该根据临床症状以及IF-ANA染色的结果进行更进一步的特异性检测。
这些特异性ELISA可检测单一的自身抗体,如:dsDNA抗体、SSA、SSB、RNP。
抗双链DNA抗体特异性的用于SLE的诊断,其含量水平会在活性期增加。zui近发布的ACR指导建议需进行双链DNA抗体检测的有:患有急性肾小球肾炎孕妇的每月检测、患有急性肾炎的患者或者曾经患有肾炎的孕妇的每三个月检查、曾经患有急性肾炎的患者的每六个月检查。
体内不存在抗双链DNA抗体的SLE患者通常会带有抗单链DNA抗体。同样的,抗RNP抗体也是高度特异于SLE,但是该抗体仅在10~30%的SLE患者体内出现。
抗SSA、抗SSB抗体通常暗示着干燥综合征,但是同样会在30%的出现有皮肤牵连的SLE患者体内检测到。
抗SSA抗体可以通过胎盘而可能引起胎儿的SLE疾病。同时抗SSA抗体在那些胎儿患有先天性心脏病以及新生儿狼疮的母亲体内总是能够被检测到。
【检测原理】
微孔中包被有高纯度的核抗原(SS-A 60、SS-A 52、SS-B、RNP-70、Sm、RNP/Sm、ScI-70、着丝点B、Jo-1)。样本中的特异性抗体会结合到微孔板的抗原上。洗板以除去非特异性的血清和血浆成分。辣根过氧酶标记的抗人IgG可检测已结合的病人抗体,从而形成酶联物/抗体/抗原复合物。洗板以出去未结合的酶联物。底物液遇到酶联物后水解形成蓝色。加入硫酸终止反应以形成黄色终产物。在酶标仪上450nm处测量黄色的强度,所显示的颜色强度直接与样品中特异性抗体的浓度直接成正比。
【贮存条件】
避光保存在2~8℃下
使用及储存时应避免将试剂暴露在高温、阳光、以及强烈光照下
有效期18个月
稀释好的洗涤液及样品缓冲液保存在2~8℃下,30天内稳定
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